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奧林巴斯顯微鏡:暗視野顯微鏡故障排除

2013-10-16  發布者:admin 

有許多相關的常見問題與暗視野顯微鏡和顯微攝影或數字成像。 這些範圍從使用不正確的大小視場光闌足夠的照明和聚光鏡失準。 暗場照明問題都與台下聚光器,這應該是第一個問題,當事情不正常工作。 成像標本時使用這種技術,下麵的問題和解決辦法應作為一個指南。

問題: 
有足夠的照明,使樣本可見,,或試樣是可見的,但非常微弱的。

解決方案 :燈電壓可設置得太低,或燈泡可能沒有足夠的強度,以適當地照亮試樣。 最多約12伏的電壓升高(為12伏,100瓦鎢鹵素燈泡)或更換光源,如果可能的話,與一個更大的強度。 如果不解決這個問題,檢查台下聚光器,以確保其適當的大小與視場光闌的正確定位。 另外,檢查的顏色和/或中性密度濾光片,偏光片,相位差板,或任何其他組件,可能減少照明強度的光路徑。 

如果這個問題出現高數值孔徑反映聚光鏡,檢查聚光鏡頂級鏡頭是正確的顯微鏡幻燈片底部的油。 如果浸沒接觸已被打破,重新把聚光鏡油和架起來,直到頂端透鏡完全浸在油中,並在與底部的滑動接觸。

問題: 
視野有一個黑點在中心,減少光照強度,但在外圍的對象是良好的照明和顯示正常。

解決方案 :要麽是不正確的位置台下聚光器或光站的物鏡是錯誤的大小。 小心地機架物鏡向上和向下,同時觀察在視野標本。 進行檢查,以一定的,兩個聚光鏡光圈和視場光闌被設置為敞開位置。 如果這並不影響照明,使它稍大或稍小的改變視場光闌的大小,然後重新檢查照明。 

有時候,這個問題產生,當顯微鏡載玻片過厚(更大的比標準1毫米的)。 使用千分尺或一組表卡尺來確定的厚度的滑動和滑動/蓋玻片組合。 如果滑動過厚時,要麽改變正確的厚度的滑動或者“檢查聚光鏡,以確定它是否可以進行調整,以補償不同厚度的幻燈片。

問題: 
燈往往有一個很短的壽命,並與黑色蒸發鎢塗層的燈泡內部的燒結。

解決方案 :在過高的電壓很長時間,這肯定會減少壽命的燈泡已使用。更換燈泡和燈電壓降低後觀察和/或試樣的顯微攝影。

問題: 
圖像具有的明視野周邊帶或不帶在中心的暗區。

解決方案 :這個問題是典型時,台下聚光器錯誤地居中或視場光闌是太小了。 恢複到明視場,並重新建立的科勒照明條件,然後重複暗場過程中,確保聚光鏡的中心。 如果這沒有幫助,增加視場光闌的大小,直到適當的暗場條件成立。 

這個問題也可能出現時使用的物鏡,過高的暗場聚光鏡的數值孔徑。 如果在物鏡內部有一個可變光闌,降低光圈孔徑的大小來確定,如果太多的斜光進入的物鏡前透鏡。 此外,它可能有助於提高到一個更高的數值孔徑反射的暗場聚光鏡的視場光闌的大小或更改。

問題: 
僅在一側的外圍的視野是光明的。

解決方案 :檢查物鏡轉換器,以確保物鏡被正確地定位在光軸的顯微鏡。 有一個定位的物鏡是適當的位置時停止,將產生一個正的“啪嗒”。 如果不正確的中心視場光闌,也可能會出現的問題。 取下目鏡,並把相望遠鏡的眼睛管(或使用伯特蘭透鏡),然後使用中心的螺絲以正確對齊視場光闌。

問題: 
圖片的標本不明確,缺乏足夠的對比度和細節。

解決方案 :暗視野顯微鏡的樣本可能不適合。 許多染色標本不分散足夠的光線暗場條件下可以清楚地成像。 試樣的厚度,也可能是一個問題,因為非常薄的樣品往往不成像以及從暗視野聚光鏡發射與傾斜光線。 切換到明場,相襯,DIC,霍夫曼調製對比度,以確定這是否提高了標本的對比。

問題: 
明亮的區域,重點阻撓的暗場標本的觀察和/或顯微攝影。

解決方案 :這可能是由於灰塵,頭發,纖維,和/或聚光鏡上方某處的光學表麵的髒物汙染。 徹底清潔標本的光學級組織或棉花。 有時候,這個問題的產生是由於在物鏡前透鏡的汙染。 小心地鬆開物鏡,其所在地的消防水槍,慢慢地打開,而通過目鏡觀察樣品。 如果阻塞隨著旋轉的物鏡,那麽它可能是由於灰塵上的前透鏡。 刪除的物鏡和滋潤鏡頭前輕輕地呼氣,然後再用鏡頭紙或棉簽包裹的長木杆。 更換的物鏡和檢查,以一定的阻礙已被完全刪除。

問題: 
均勻地照亮的背景,但不是全黑或出現灰色的顏色。

解決方法 :這個問題通常發生在不透明的場站為物鏡太小。 取出的目鏡和查看的後焦平麵上的一個光路中的樣本的情況下,無論是用相位望遠鏡或伯特蘭透鏡的物鏡。 整個背部焦平麵應該是黑暗的,沒有任何邊緣明亮的光線出現在周圍。 如果觀察到的光的弧或圓中的物鏡的後焦平麵上,改變到一個稍大的視場光闌。 此外,降低視場光闌的大小,將有助於在抑製眩光和一個烏黑背景,(注意不要關閉虹膜光圈太多)。

問題: 
聚光鏡的圖像部分地填充視野,遮蔽試樣的細節。

解決方案 :可調節的滑動可能太薄或聚光鏡的太高。 測量厚度的顯微鏡幻燈片進行檢查,以確定油接觸不破。 如果遇到困難,保持底部的幻燈片油,請嚐試使用較厚的幻燈片。

問題: 
顏色出現在背景中,或用灰鑄鐵的背景光線不均。

解決方法 :這個問題經常發生在整個很厚的坐騎,或過多時,散射光汙染工件的安裝介質中捕獲。 倒閉的視場光闌和旋轉標本,以找到最好的方向,然後確定問題是否已得到糾正。 試樣可以被重新安裝在較薄的裝載或安裝介質,可能需要進行過濾。 用柔軟的鏡頭紙或棉簽小心地清潔整個的顯微鏡載玻片和蓋玻片。

問題: 
查看水生生物的在水性安裝,標本漂在一個單一的方向不斷,難以觀察和顯微攝影。

解決方案 :對流電流正在創建在蓋玻片的邊緣由於緩慢蒸發。 放置的胎圈,凡士林或Cytoseal安裝牢固地密封到顯微鏡載玻片上的周圍介質的外周的蓋玻片。 商業產品是可用的,可以被加入到水中,以減緩這些微小的生物體的運動,使得它們更容易拍攝。

問題: 
當觀看試樣通過10x物鏡,有一個長橢圓形的光點的中心的視野

解決方案 :聚光鏡可能被錯誤地聚焦或擴散過濾器可能會丟失,導致的圖像出現在視野的燈絲。 重新聚焦在聚光鏡和作出若幹光路中的過濾器是一種擴散。

問題: 
視野有亮點,有問題的樣本與實現大家關注的焦點。

解決方案 :小氣泡可能被困在聚光鏡的頂部和底部的顯微鏡載玻片之間的油。 取出的目鏡(或插入伯川德透鏡)觀察的後焦平麵上的物鏡,其中的氣泡將是可見的。 為了彌補,打破油接觸,並用棉簽除去殘留的氣泡。清潔聚光鏡的前鏡頭與顯微鏡玻片上多餘的油,然後申請一個幹淨的滴油的鏡頭。 如果問題仍然存在,徹底清潔所有的光學表麵,然後再重新將油。

問題: 
在高放大倍率,膠體粒子顯示不完整的牛頓環,並出現不均勻的照明。

解決方案 :聚光鏡可能是偏離中心。 切換到低功耗的物鏡和中心聚光鏡。 仔細檢查,以確定更高的功率物鏡是否具有不同的中心,及若有,顯微鏡光軸中心的物鏡



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