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新聞資訊

奧林巴斯顯微鏡光染色與DIC顯微鏡

2014-05-05  發布者:admin 

 通過引入雙折射補償板成一個微分幹涉對比(DIC)的顯微鏡的光路,被超過的灰度值的一個有限的範圍內以其他方式呈現透明的標本可以轉化通過稱為光學染色的技術中,以顯示多種顏色的。 這種互動式教學探討如何改變偏見遲緩的量會影響染色的標本圖像實現的外觀和水平。

教程初始化與隨機選擇的DIC圖像中出現的具有施加到光學係統中的小偏差的延遲值(1-第二十一個波長)的標本圖像窗口。 要操作教程,為了在試樣圖像產生高階幹涉色翻譯偏置遲緩滑塊移動到較高的值(在右邊)。 該滑塊有1/20和遲緩的全波長之間的工作範圍。 新的標本可以通過選擇在選擇樣本下拉菜單中選擇相應選項進行檢查。

在微分幹涉對比正常和非常波陣麵之間的偏置相位差可以通過使用補償器的最初目標是定量的相位差測量裝置和對比度增強元件為偏振光顯微鏡來操縱。 補償板賦予更大的控製,用於調整試樣的細節的對比度相對於背景亮度和顏色值,並且還使波陣麵之間的偏差值的更精確的調整。 這些雙折射元件也經常用於透明的標本,其通常呈現在灰度值的有限範圍內的光的染色。

當一個標準的客觀諾馬斯基棱鏡沿著超越四分之一波長,這兩種試樣的特征和背景的路徑差的顯微鏡光軸翻譯獲得的牛頓幹涉色類似於那些在偏振光顯微鏡觀察到的光譜。 樣品和背景成為光學上的彩色顏色的該遷移通過一係列的灰度值,通過白色,黃色,紅色,藍色和更高階的過渡。 光染色產生的戲劇性和精美的彩色圖像,但僅限用於科學應用。 通常,最佳的標本對比度僅限於二十分之一到的相位差的四分之一波長的範圍內。

補償器可插入任一目標棱鏡和分析儀或偏振器和冷凝器的棱鏡之間的DIC顯微鏡的光學路徑。 許多顯微鏡有位於中間管或台下聚光住房為此而設計的一個插槽。 另外的一階補償器(通常稱為全波一階紅色板)具有相位差值等於全波長在可見光(約550納米)的綠色區域,引入的幹擾色的光譜,以樣品和背景。 用在這裏的補償器,綠色光不能穿過分析儀,因為它出現從相位差板的線偏振光與電場矢量具有相同方向的偏振器。然而,在紅色和藍色光譜區域的波陣麵會遇到比波長小於相位差,成為橢圓偏振光,使他們能夠通過分析器傳遞組件。 其結果是,這些顏色成為混合以形成品紅色背景中的視場。

因此,當試樣中的白色光用微分幹涉對比光學和一階補償器觀察到的,而圖像的對比度被顯示在的二階藍色和一階黃色的顏色(取決於方向)的背景顯示品紅色牛頓幹涉色光譜。 有了補償,偏置遲緩小的變化由諾馬斯基棱鏡(或旋轉偏振鏡以脫Sénarmont補償器)產生的具有大的路徑長度梯度結構觀察快速變化的幹擾色的翻譯得到的。 這種技術是用於將彩色(光染色),以具有高折射率的邊界,如細胞膜,細胞內的大顆粒,纖毛和細胞核的區域是有用的。 由試樣的特性所顯示的幹涉色可被比作一個米歇爾 - 列維顏色圖表上的值,以獲得的光程差的估計值。

如圖1所示,是已被光學地染色,並通過DIC光學技術呈現在偽三維浮雕幾個透明標本。 圖1(a)給出了預測在櫛鱗魚鱗的邊緣,而犬鉤蟲( 鉤蟲 )的嘴的特點是在圖1(b)所示。 大豹蛾(Ecpantheria scribonia)五顏六色的翅膀上的鱗片列於圖1(c)。 在所有情況下,利用Nomarski棱鏡被穿過顯微鏡光軸轉換為偏置相位差值超過一個完整波長。 雖然這些圖片沒有透露有關該標本隱藏的科學信息,他們確實有提前DIC的光學顯微鏡的技術,因為科學和藝術之間的橋梁合法的潛力。

上裝有一個去Sénarmont補償器用於引入偏置到一個微分幹涉對比光學係統的顯微鏡,一個全波相位差板可以被添加到光學染色用牛頓幹涉色的樣品,並提供有關路徑的差異更加定量的信息。 去Sénarmont補償器經常采用在DIC顯微鏡取得偏置相位差的精確測量的水平,但該設備也有用以監測光學部件的對準。 在視頻增強DIC(VE-DIC)的顯微鏡,德Sénarmont補償器通常用於優化在標本細節對比度在於下麵的顯微鏡的分辨率極限。



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