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奧林巴斯顯微鏡光學切片與相差和DIC

2014-05-08  發布者:admin 

 一個微分幹涉對比(DIC)顯微鏡超過相襯的主要優點是,利用該儀器在充分的數值孔徑而不遭受相位板或冷凝器的環的掩蔽效應,這嚴重限製了在冷凝器和目標孔的尺寸的能力。 主要的好處是提高了軸向分辨率,特別是關於對DIC顯微鏡在大光圈大小,以產生良好的高清晰度圖像的能力。 這種互動式的教學探討和比較厚的樣品與DIC和相襯的光學切片,並揭示了無限製的光圈效應的優勢上取得良好定義的部分。

教程初始化與隨機選擇的樣品中出現的每一個試樣的圖像窗口的圖像。 左側窗口,標題為DIC的標本的圖像,包含具有一個微分幹涉對比光學係統所捕獲的樣本的圖像,而當在相位對比成像的右側窗口( 相位對比試樣的圖像 )顯示相同的試樣。 在雙窗口中顯示的顯微鏡焦平麵是相同的每個標本。 為了操作的教程,使用目的對焦滑塊來模擬通過各種軸向焦平麵成像同時對標本的影響。 當滑塊被轉換到左側,上側焦平麵變得可見,並移動滑塊向右揭示了低級焦平麵。 一個新的標本可以在任何時候通過使用選擇A試片下拉菜單列表中選擇。

因為相位對比圖像可以變得模糊(或什至遇到反轉對比度)時,試樣的光程長度的波動在大範圍內,該技術應僅限於試樣具有十分之一波長或更小的光程差,如前麵所討論。 換句話說,厚的樣品,或那些具有楔形結構,一般不適合用於定量調查與相差顯微鏡。 薄樣品也往往在微分幹涉對比,以產生高質量的圖像,但是在寬孔口采用光學切片技術更厚的試樣(具有十分之一和全波長之間的光程差)也可以成像。

在相襯照明孔徑是固定的聚光器環的尺寸,並且不能被改變以實現字段的增加或減少的深度。 這種限製阻礙了含顯著暈文物標本的觀察,這有時晦澀的標本集中的特點,由於重疊的細節強光始發始發的客觀焦平麵以外。 經常試圖圖像標本太厚相襯時出現這樣的問題。 然而,如前麵所討論的,微分幹涉相襯顯微鏡的光學切片的能力(在寬冷凝器孔徑大小)可實現出色的圖像,以與相對較厚的樣品獲得的。

從厚的樣品在差示幹涉反差大孔徑的光學部分的好處是,如圖1所示,並與成像相襯相同viewfields。 圖1(b)示出從藪枝螅水螅成像在高放大倍率在DIC與冷凝器光圈開口設置為大約95%的目標孔徑大小的生殖息肉一個水母芽。 由此產生的超薄光學部分揭示了水母的特點,這隻是最低限度的光始發離焦平麵遮住重點突出圖像細節。 當相同的視場進行檢查在相襯(圖1(a))時,水母圖像由光暈和表現出降低的分辨率,由於光學係統的孔徑限製的模糊。

類似的情況是通過1列於圖1(C)(f)條。 圖1(c)描繪了從帝王蝶( 斑蝶屬條紋 ),在北美地區最常見的蝴蝶1重疊的翅膀上的鱗片。 個人尺度是因為暈文物和模糊的功能,是不是在焦點平麵的沒有區別,如圖1(c)所示。 在一般情況下,圖像是由許多工件相混淆,使得試樣的特性難以破譯。 在成像微分幹涉對比同一標本(圖1(d))消除了許多分散注意力的文物位置遠離焦平麵,並明確界定在一個單一的翅膀鱗片的表麵特征。 同樣,犬絛蟲黃瓜( 犬複孔絛蟲蟲 )的腹部內的蛋包揭示了周圍個別雞蛋時,在DIC(圖1(f)項)成像銳利的邊緣。 然而,集中雞蛋是缺乏獨特結構的相位對比(圖1(e)),主要是由於從其他雞蛋暈位於遠離焦平麵。

在大型冷凝器孔徑尺寸和高數值孔徑微分幹涉對比光學切片功能對於單一成像焦平麵厚厚的階段標本的關鍵。 從特征躺在眼前焦平麵之外細節和雜散光不包含DIC圖像以相同的方式作為相位對比圖像,這往往是由鹵素工件複雜。 因此,微分幹涉對比可以采用稍微不利條件下(非常厚的樣品)下得到良好的圖像,即使在大景深呈現在相差顯微鏡相結構是不可能的識別由於重疊的細節。



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