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尼康顯微鏡黃色熒光激發塊組合

2014-06-08  發布者:admin 

 尼康黃色激發熒光的篩選器組合包括兩個平衡組合包含完全排放 (障礙) 帶通濾波器能夠有選擇性地隔離通過任一熒光發射的橙色、 紅色和近紅外譜區窄或寬波段。此交互式教程探討了如何在勵磁和排放變化篩選譜線輪廓,以及那些與雙色鏡,影響信號水平、 篩選器的整體性能和圖像對比度組合為黃色區域的熒光基團的激發而設計的。

本教程使用初始化一個隨機選定的熒光標本標本圖像窗口和窄帶通排放 (Y-2E/C; 默認) 黃色勵磁的篩選器組合光譜顯示的配置文件篩選器設置的譜線輪廓圖上出現。組合的篩選器透射和反射光譜疊加到吸收和發射譜吸收利用標簽標本的熒光黃色的 (熒光光譜的配置文件並不包括自體熒光植物標本)。在本教程中,使用一個棕色的填充,而用灰色填充表示相應的發射譜介紹了熒光基團吸收譜。在本教程中右下角的黃色框中顯示由篩選器設置滑塊表示的篩選器組合波長特性。這些值是不斷更新,滑塊翻譯從左到右。

為了運行本教程中,使用篩選設置滑塊以瀏覽黃色勵磁的兩個篩選器組合之間的過渡。隨著滑塊翻譯從左到右,修改的譜配置文件勵磁和屏障的篩選器,以及那旗麵鏡子,以模擬到光譜的配置更改。注意到不斷變化的譜線輪廓並不意味著任何篩選器組合是可能的也不是單個篩選器設置變量 (不實際更改篩選器) 中的譜線輪廓的問候。選定的篩選器集之間的譜線輪廓的變化隻被旨在幫助建立在每個光學的塊中使用的篩選器組合之間的關係。

可以添加或由選中或取消選中相應的複選框在圖表下方從篩選器設置的譜線輪廓圖中刪除單個篩選器譜(勵磁、 排放和旗麵鏡像)。此外,熒光基團吸收和發射譜可以添加或刪除與一組類似的複選框 (光譜剖麵)。標本圖像同時更改篩選器配置文件以反映變化相反和信號產生的改建的篩選器組合產生的滑塊的翻譯水平。可以在任何時候使用的選擇 A 標本下拉式菜單和利用的標簽下方菜單框中列出了選定的標本的熒光團選定的新標本。在許多情況下,標本都染有兩個或更多的熒光探針,表現出的熒光與窄和寬的通頻帶屏障 (排放) 篩選器設置的選擇性分離。

尼康黃色激發熒光的篩選器組合組包括納入單一 (障礙) 帶通濾波器能夠有選擇性地分離熒光發射橙色到紅色的光譜區域內的兩個仔細平衡的集。這些補充的篩選器組合激勵波長範圍廣的 532 到 587 納米通頻帶寬度的 40 至 55 納米。這兩個組合采用同一 longpass 旗麵上的鏡像 (595 納米切-)。兩個尼康黃色勵磁的篩選器集將納入了帶寬的 60 和 75 納米帶通濾波器的障礙。

兩個尼康的黃色勵磁篩選器設置納入排放 (障礙) 帶通濾波器旨在減少或消除幹擾的熒光團排放在遠紅色或近紅外的光譜區域,尤其是對於標有多個探頭的標本。兩個篩選器組合覆蓋相同的一般光譜波段,而在大多數的應用程序中可以互換。Y-2E/C套 40 納米勵磁樂隊 (540-580 納米) 結合排放通 60 毫微米 (600-660 納米),阻擋了大部分的近紅外譜區的深紅色。

Texas Red HYQ 組合 (尼康高性能HYQ篩選器組的成員) 有類似光學規格,雖然與更廣泛的勵磁和排放帶通地區 (55 和 75 納米,分別)。這一組勵磁通頻帶已從 532 到 587 納米的波長範圍,結合 75 納米排放通頻帶 (608 到 683 納米)。增加通頻帶寬度傳輸更大的激勵和排放能源,從而導致更明亮的圖像,以及排放檢測進一步擴展到深紅色區域。每個互補篩選器組合利用同一旗麵鏡子,有的切對波長為 595 納米。這兩套提供性能特別優化的德克薩斯州紅、 Alexa 流體和使用 Cy3.5熒光染料,雖然他們是適合與一係列的興奮的黃色波長的熒光團一起使用。由於更廣泛的帶通窗口,圖片使用的Texas Red HYQ集生產反映更紅信號的檢測,並且有些明亮時相比,那些獲得Y-2E/C結合。

尼康黃色勵磁的篩選器組合規格
篩選器設置
說明
勵磁
篩選器 (nm)
旗麵
鏡像 (nm)
屏障
篩選器 (nm)
備注
Y-2E/C 560/40
(540-580)
595 (LP) 630/60
(600-) 660
中型勵磁樂隊
屏障帶通濾波器
Texas Red
HYQ
560/55
(532-) 587
595 (LP) 645/75
(608-) 683
寬勵磁樂隊
屏障帶通濾波器
表 1

 

  • Y-2E/C Y-2E/C的篩選器組合為黃色波長勵磁設計作為專業篩選集德克薩斯紅和 Cy3.5,用的雖然與跨越 (重疊部分的綠色區域) 的黃色波長的大部分勵磁帶寬,集可以使用與其他熒光染料的範圍。帶通濾波器屏障傳輸信號從橙色和橘紅色發光的熒光團,同時消除了大多數的紅色和近紅外發射。

  • Texas Red HYQ -Texas Red HYQ篩選器組合有類似組件配置文件到Y-2E/C集,但與更廣泛勵磁和排放帶通窗口,使它能夠傳輸更多的能量和產生較亮的圖像。結果圖像也反映出額外的紅色熒光信號由於發射濾波器通頻帶的引伸到紅色光譜區域的較長波長。

 



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