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尼康顯微鏡相差對齊方式

2014-07-04  發布者:admin 

 相襯顯微鏡的仔細比對是必要的,以便產生最大的反差效果,而不會引入降解標本外觀或導致錯誤的解讀文物。本互動教程將檢驗標本的顯示方式通過 (在不同的放大倍數) 目鏡當聚光鏡環轉移入和出相位板在物鏡中對齊的變化。

本教程使用初始化上右手邊的教程在顯微鏡圖像窗口中出現隨機選定的階段對比試樣。毗鄰此窗口是物鏡的後方焦平麵視圖 (題為物鏡後方焦平麵; 在左邊) 說明的接近度物鏡相板和聚光鏡環。默認情況下,物鏡相板和聚光鏡環光錐不對齊,必須使用翻譯 XY 平移滑塊重新定位。翻譯這些滑塊,使操作者調整聚光鏡環光錐的固定物鏡相位板的位置。當兩個環形居中時,得到最大可能樣本的對比。

作為翻譯滑塊的替代方法,可以用於鼠標光標拖動窗口內的聚光鏡環圖像,以便可以在周邊的物鏡相板內任意位置定位。新標本可以將加載到本教程中所使用的選擇 A 試樣拉下菜單,並可以使用選擇物鏡菜單中更改的物鏡的放大倍數。選擇新的標本或物鏡時,每次本教程自動重新加載的聚光鏡環和物鏡相戒指隨機偏差。

在查看時固定的相位環在物鏡中使用貝特朗 · 鏡頭或一個階段的望遠鏡,經營者然後可以執行對聚光鏡環位置以對齊兩個相位對比觀察調整 (見圖 1)。在圖 1 中給出了是在不對中的物鏡後焦平麵的圖像 (圖 1 (a) 和 1(c)) 和後的聚光鏡環和相位環已經正確對齊 (圖 1(e))。也說明了在此圖中的相應顯示圖像的查看通過目鏡時 (圖 1 (b)、 1 (d) 和 1(f)),這表明標本顯微鏡是未對齊的顯示方式 (圖 1 (b) 和執行和仔細地對齊 (圖 1(f)) 根據下文所述的過程。

在試圖使一個顯微鏡相襯觀察,檢查儀器仔細,以確保所有物鏡包含相位板,並牢固地安裝在物鏡轉換器。物鏡也應在他們的安排上物鏡轉盤,從低到高的放大倍數,以盡量減少一聚光鏡環和另一個之間的轉換頻率順序排列。經常在 10 x 和 20 x物鏡,分享共同的聚光鏡環、 做 40 x 60 x 物鏡。高度修正的物鏡,如色差設計用於油浸泡,經常有類似數值孔徑和利用相同的聚光鏡環在更廣泛的放大倍數 (100 x 40 x)。低功率相襯 (4 x 和 (5) 通常需要擺動鏡頭聚光鏡和專門的聚光鏡環。

聚光鏡環形板上也應該按順序安排,與環為較低的放大倍率物鏡設計和程序設計的最高放大倍數的一個開始。一般情況下,整個放大倍率範圍可以覆蓋著三個或四個單獨的環形空間。如果采用通用的聚光鏡,位置最低放大倍數環 (例如,菲律賓Ph1) 右側的明視場插槽和其他板按順序相鄰的插槽中。通常情況下,試樣必須審查在明視場之前或之後相位對比觀察,所以這項安排將會提供一個簡單的工作流。

以下步驟被建議相襯顯微鏡的對齊方式。

  • 在載物台上放置明亮染色的標本並旋轉 x 相襯物鏡 10 成的光學通路在明視場照明模式。集中的標本,並關閉字段隔膜直到它進入視場的邊緣。使用的聚光鏡的高度調整旋鈕,位置聚光鏡所以個人留下的領域隔膜中關注的焦點,和使用主聚光鏡為中心的調整旋鈕,以確保字段隔膜居中的視野。請仔細檢查顯微鏡配置,以確保取得了柯勒照明,和樣品的是大家關注的焦點。

  • 刪除染色的標本和顯微鏡載物台上放置一個相位的標本。在的情況下物鏡標本已隻有最小的光學路徑差異 (可能很難想象),與一個已知的能夠產生相位對比模式,高對比度的標本對齊顯微鏡。旋轉聚光鏡炮塔,直到適當的環位於中的光學通路 (Ph1或等值為 10 x 物鏡)。檢查以確保聚光鏡環顏色代碼或題字與匹配的物鏡。檢查聚光鏡孔徑隔膜杆位置,並將它移動到最大光圈的位置 (聚光鏡設計階段對比可以自動這樣做)。

  • 如果顯微鏡配備貝特朗鏡片,使用拇指控製鏡頭已準備就緒。或者,刪除其中一個顯微鏡目鏡,觀察管中插入一個相位的望遠鏡。

  • 同時通過目鏡或相位望遠鏡眯著眼睛,調整貝特朗 · 鏡頭或望遠鏡焦點眼管的重點直到相位板中,物鏡是在大家關注的焦點,和聚光鏡環的鮮明的形象和黑暗的中性密度材料在相位板之間的重疊,顯而易見。在許多情況下,在顯微鏡最初將不對齊和環圖像會不準確地覆蓋在相位板的中性密度材料 (如圖 1 (a) 和圖 1(c)) 所示。

  • 找到的聚光鏡環定心針 (或螺釘) 和調整環一雙螺絲起子或適當的旋鈕的位置,直到它是符合物鏡相板 (圖 1(e))。注: 不嚐試調整聚光鏡環的位置與主聚光鏡為中心 (通常位於上聚光鏡安裝支架連接到顯微鏡) 的旋鈕。這一努力很可能不會達到預期聚光鏡環對齊方式和絕對會妥協應以前建立的科勒的光照條件。

  • 當聚光鏡環正確居中對齊時,環的光通過聚光鏡會減弱所應用到的物鏡相板,降低環圖像的強度的中性密度材料。因此,如果聚光鏡環不當為中心,一個明亮的新月形邊緣會出現毗鄰中性密度材料在物鏡相板 (數字 1 (a) 和 1(c))。如果環的圖像不適合在相位板黑圈內,然後要麽聚光鏡是焦距 (和柯勒照明不成立的),或相望遠鏡 (或貝特朗 · 鏡頭) 重點並不在物鏡的後焦麵。在一些情況下,即使當相望遠鏡 (或貝特朗 · 鏡頭) 和聚光鏡適當集中,聚光鏡環圖像變得模糊和出現失焦。這可能會引起低頻率衍射從標本。如果發生這種情況,卸下試件從載物台和進行顯微鏡下的對齊方式。

  • 如果聚光鏡環圖像的大小從那物鏡相板顯著不同,檢查看看如果錯了環板被安裝在聚光鏡 (最可能的原因)。另一種可能性,如果高數值孔徑油浸物鏡的雇用,是聚光鏡前端透鏡元件為了沉浸。在這種情況下,它可能是很難 (或不可能),疊加上沒有一滴油的聚光鏡鏡頭和顯微鏡幻燈片之間 (或物鏡和蓋玻片之間) 相位板的聚光鏡環。

  • 當聚光鏡環和物鏡相位板正確對齊,圖 1 (e) 所示的圖像應出現在相位望遠鏡或目鏡 · 貝特朗 · 鏡頭中的地方。在這一點上,在顯微鏡的配置正確,可以觀察的試件與相位對比照明。

  • 替換階段望遠鏡的目鏡,或旋轉貝特朗 · 鏡頭出的光的通路,並檢查標本。背景應該出現中性灰色的顏色 (取決於物鏡的相位板的中性密度) 與可見在高對比度的標本。

一旦為相襯,已調整顯微鏡,它一般將舉行相當數量的物鏡/環形空間的變化,其濃度,但應定期檢查,以確保正確對齊。如果顯微鏡開始滑落不對齊,出現在目鏡中 (或在計算機監視器上) 的圖像會出現越來越多像那些觀察明視場照明。



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