設為首頁 | 添加收藏 |sitemap |百度地圖 |
貨真價實 坦誠無欺
新聞資訊

奧林巴斯顯微鏡激光掃描共聚焦顯微鏡模擬器

2014-08-27  發布者:admin 

 也許在光學顯微鏡在過去十年中最重要的進展一直是細化使用的主流激光掃描共聚焦顯微鏡LSCM) 技術的改進合成熒光探針和轉基因的蛋白,廣泛的激光光源耦合到聲光可調諧濾光器的高度精確控製,和更先進的軟件的結合包裹與現代高性能計算機。此交互式教程探討了多激光熒光法和微分幹涉對比 (DIC) 共聚焦成像的奧林巴斯 FluoView FV1000 共聚焦顯微鏡軟件接口作為一種模式。

教程初始化 (出現在實時視圖窗口左側上部的教程) 隨機抽取標本被沿橫向x-y平麵的每個像素,20 微秒速度掃描和探測頻道正在設置非常接近與同時掃描在所有三個渠道的最佳值。掃描速率受控製掃描速度滑塊,提供一係列的每個像素的 2 到 200 微秒。成像深度軸向 (z) 的方向被調整決定由每個試樣的厚度範圍,根據z 軸位置滑塊。在初始化,每個通道對應目前在標本的熒光激活,並且能夠用於成像的特異性探針進行標記。透射光通道 (TD) 是默認關閉的。激光器是預先分配 (和固定的) 按以下順序在通道: 氬離子 (488 納米)-氦-氖 (543 納米)-通道 2、 通道 1 和氦-氖 (633 納米)-通道 3。TD通道產生使用氬離子激光的微分幹涉對比圖像設置在 488 納米的透射的光。

為了運行本教程中,使用每個通道的高壓增益,並抵消滑塊通過單擊箭頭按鈕在頂部和底部,或在任何地方 (每個包含藍色的水平欄) 的指標框裏麵調整的信號水平和質量。當通道電壓、 增益和偏移量的值發生了變化時,藍色的水平欄自動調整以顯示新的值,也下指標框中數值表示。此外可以通過點擊自動高壓按鈕,為了保持恒定的信號水平時增加或減少掃描速度成比例,調整這些值。該個體的照明光源激光強度值可以控製 (通過一係列的 0%到 100%) 的滑塊與毗鄰每個激光激活複選框的箭頭按鈕。使用相應的複選框打開或關閉,也可以切換,激光器。

在任何在本教程的操作期間,試樣的掃描可以通過點擊停止按鈕,停止和使用XY 重複按鈕然後重新啟動。停止按鈕被激活時,自動對比度按鈕 (在本教程的右上角) 變得啟用快速初始設置 (也激活X 4按鈕),探測器通道水平的一種做法,通常用於快速檢驗新的標本。可以用查找表按鈕 (定位之間停止自動對比度按鈕) 來改變伽瑪、 強度、 對比度和偽任何的彩色通道 (當前通道顏色表示在每個通道組框的下半部分)。模擬的快速掃描的標本 (用於定位和實際顯微鏡聚焦的) 可以通過點擊X 2X 4按鈕完成。

可以通過點擊VBF按鈕,啟動一個對話框說明選定熒光團 (列在對話框中為每個通道) 發射譜疊加在狹縫邊界調整可變探測器狹縫為通道 1 和 2。調整這些狹縫的寬度是有用,流血,通過最大化熒光發射強度的同時減少。此對話框還包含啟用選擇障礙篩選器應用於信道 3,這樣就允許用戶因第三通道而異切對波長進行排放檢測的下拉式菜單。通過點擊重置按鈕,可以恢複默認值 (由熒光組合的選擇)。

本教程模擬光譜流血,通過 (也稱為交叉) 到相鄰探測器渠道在高光電倍增管電壓和激光強度的水平。流血,通過通常可以糾正通過激活連續掃描複選框和安排通道掃描成正確的順序使用菜單 (標本不被按順序掃描時,此按鈕停用)。例如,使用共同的熒光團: Alexa 氟 488 (通道 1)、 MitoTracker 紅色 CMXRos (通道 2) 和到 PRO-3 (通道 3),每個通道可以放置在不同的組,流血,通過盡量減少。另外,通道 1 和 3 可以放在一個組中,而通道 2 掃描在不同的組來實現類似的結果。也可以通過不同的光譜檢測頻道和屏障濾狹縫寬度控製流血,通過程度,如上文所討論。在任何時候使用選擇 A 標本下拉式菜單,新標本可以將加載到教程的窗口。



滬公網安備 31011202003519號