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尼康顯微鏡矯正項圈的校準

2014-11-26  發布者:admin 

大多數顯微鏡物鏡被設計成與蓋玻璃具有0.17毫米的標準厚度和1.515的折射率,這是令人滿意的,當物鏡的數值孔徑為0.4或更小使用。 然而,使用高數值孔徑幹物鏡(0.8或更大的數值孔徑),隻有幾微米的玻璃蓋的厚度變化時導致劇烈圖像劣化由於像差,生長惡化而增加玻璃蓋的厚度。 為了補償這個誤差,在更高度校正的物鏡配有校正,以允許調整所述中央透鏡組的位置,以與在蓋玻璃厚度的波動相一致。 這種互動式的教程探討修正衣領如何調整,以達到最佳圖像質量。

教程初始化與隨機選擇的試樣中出現顯微圖像窗口和定位在圖像窗口的右側的校正物鏡的剖切圖。 此外,在初始化時,本教程會自動選擇一個隨機蓋玻片厚度標本被認為在顯微鏡圖像窗口。 為了操作教程,使用校正領滑(注意, 可移動鏡頭組在物鏡上也翻譯這個滑塊)來調整這個值約為0.17,或標準蓋板玻璃的厚度。 下一步,使用顯微鏡聚焦滑塊,以獲得清晰的圖像標本可能。 取決於預先選定的護罩玻璃的厚度(由教程確定),檢體圖像,可能會降低或變得更尖銳作為滑塊移動到右側或左側。 繼續使用兩個校正項圈顯微鏡焦點滑塊以提高檢體的圖像。 在本教程護罩玻璃校正覆蓋厚度變化範圍從0.10至0.25毫米。

標準厚度為蓋玻片為0.17毫米(170微米),其被指定為數字1.5護罩玻璃。 不幸的是,並非所有的1.5蓋板玻璃的製造,這種密切的寬容和許多標本具有廣泛變化的他們和玻璃蓋之間的折射率的介質。 補償玻璃蓋厚度可以通過調節顯微鏡的機械管的長度或通過專門的校正環能夠改變物鏡筒內臨界透鏡元件之間的間隔的利用來實現。 校正套環調整,以補償這些細微的差別,並確保最佳的物鏡性能。 與矯正項圈正確應用的物鏡要求在顯微鏡的經曆,並提醒足以重新使用適當的圖像標準的衣領。 在大多數情況下,焦點可能轉向和圖像可能調整校正領的過程中徜徉。 使用下列步驟進行小的增量調整,物鏡的修正領,同時觀察變化的樣本圖像。

  • 定位校正,這樣在物鏡桶指示標記刻在衣領住房0.17毫米刻度線重合。

  • 將在載物台上的標本,並聚焦顯微鏡上的一個小樣本的特征。

  • 旋轉校正衣領非常輕微和重新聚焦的目的,以確定是否所述圖像具有改善或退化。由於這樣的事實,大部分試樣的準備從玻璃蓋遭受/媒體三明治太厚,通過嚐試更大的補償值(0.18-0.23)首先啟動旋轉實驗。

  • 重複前麵的步驟,以確定該圖像被改善或降低作為校正套環被接通在一個單一的方向。

  • 如果圖像已退化,按照相同的步驟並旋轉校正衣領向相反的方向(朝向下的值)來查找位置提供最佳的分辨率和對比度。

當工程師設計高數值孔徑幹物鏡,它們包括的光學性質和定位在所述前透鏡和玻璃蓋在計算之間以滿足光學校正等光程和正弦條件介質的厚度。 物鏡旨在與油用作成像介質被視為好像該培養基中的前透鏡的延伸,並且相應地校正。 與前透鏡和蓋玻璃之間的空氣用非浸漬的物鏡,在玻璃蓋的厚度和分散性能的微小變化能成為色,球形,和慧差的來源。 此問題也發生在針對沉浸在甘油或水成像標本的物鏡。 使用具有校正一個物鏡需要大量的實踐和認真關注。 當套環被調整,焦點趨於移位和圖像經常飄蕩,從而導致聚焦誤差和增加像差工件。




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