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徠卡顯微鏡激光顯微切割特定應用的耗材

2018-03-29  發布者:admin 

有許多不同類型的消耗品的激光顯微切割儀器。它們涵蓋了廣泛的應用,從基本到高度專業化,使科學家能夠選擇自己單獨的配置無論他們的研究領域。

最常見的消耗品是各種玻璃膜載玻片與標準帽或蓋條帶的組合來收集dissectates。幀滑動時,培養皿有和沒有PEN膜,可堆疊膜環,Ibidi載玻片和多個腔室培養玻片也可使用。此外,芯片實驗室(LOC),所述AmpliGrid,一種特殊的形式可以在激光顯微切割使用。

玻璃膜載玻片

覆蓋有具有高的紫外線吸收膜的玻璃載片,使它們特別適合於冷相片消融(汽化),被稱為玻璃膜的載玻片。這種類型的滑動示出在左側的圖1a。

施加到玻璃載片的上表麵上,所述膜粘接於玻璃在其邊緣處,以便一個最小的空間保留在玻璃和膜之間。將膜特殊塗層,以確保試樣的最佳粘合。

在一般情況下,玻璃膜載玻片具有在膜 - 輔助的激光顯微切割(LMD)多用途的應用潛力,並配有各種塗料用於不同應用。(奧林巴斯顯微鏡)

小心處理的箔是必不可少,以避免損壞該膜。應該避免在玻璃和膜之間積聚的水分,因為這可能會導致dissectates粘到玻璃上。有玻璃載玻片兩種不同類型的膜:

PPS(聚苯硫醚)

PEN(聚萘二甲酸)


圖1a和1b分別示出用於與在不同地方的載玻片的掃描階段標準試樣保持器。

 

圖1A,1B:每張照片顯示了掃描階段容納3張載玻片標準樣品架。圖1a示出一個載玻片(左),一幀滑動(中心)和一個Ibidi載玻片(右)。

 

(載玻片尺寸:52×76mm,使用麵積為LMD 39×45 MM)

這些是PEN或PPS膜的載玻片為所用,例如,在組織切片中神經科學的形式(參見尤其是大的標本艾倫瓊斯'視頻)。一個特殊標本持有人可用於顯微切割。大玻片可以看出,在Figsures 2a和2b。

PEN與PPS膜滑梯

(載玻片尺寸:26×76mm,使用麵積為LMD 19×41mm)

標準載玻片具有PEN膜。這些可用於最LMD應用除DIC模式和在植物研究中使用的非常高的激光能量,例如。  

PEN膜的載玻片,可以在經過認證的無RNA酶和DNA酶-自由版本可用,以保證在DNA和RNA的研究無汙染的工作。像的PEN膜的載玻片,PPS包衣膜載玻片還可以在幾乎所有激光輔助顯微切割技術中使用。的PPS膜的載玻片有較少的自體熒光和一個光滑的表麵結構比與滑動PEN膜,但具有較少的抗性比PEN滑動以與二甲苯化學處理,例如。特別是,PPS比PEN更適合組合使用與HY-升套件。另外,也可以使用浸油的物鏡連同載玻片用於激光顯微解剖。當使用載玻片用油浸物鏡,把它們在試樣保持器具有麵向下方的組織是重要的。

圖2a和2b:該試樣保持器可用於大的PEN或PPS滑動以及用於培養皿(參照圖7A)。


大PEN和PPS載玻片

(載玻片尺寸:52×76mm,使用麵積為LMD 39×45 MM)

這些是PEN或PPS膜的載玻片為所用,例如,在組織切片中神經科學的形式(參見尤其是大的標本艾倫瓊斯'視頻)。一個特殊標本持有人可用於顯微切割。大玻片可以看出,在圖2a和2b。

PEN蓋玻片載玻片

(載玻片大小:26x76mm,使用麵積為LMD 19x41mm)

這些是玻璃蓋玻片載玻片用的PEN膜和可用於大多數LMD的應用,如在PEN載玻片上。除了標準的PEN載玻片蓋玻片載玻片可用於高能量的應用程序和與150x物鏡的組合。

幀載玻片

(載玻片尺寸:26×76mm,使用麵積為LMD 16×45 MM)

幀載玻片包括可覆蓋有各種膜(圖3b)的金屬框架的。下麵的膜可用於這種類型的載玻片的:

PPS(聚苯硫醚)

PET(聚對苯二甲酸乙二酯)

POL(聚酯)

螢光燈(fluocarbon)


再加上特殊的150X幹物鏡,提供了極高的分辨率,無需浸油,幀載玻片是優秀的單細胞和染色體應用。作為dissectates使用幀滑動時,直接附著到該箔,它們特別適合於非常小的樣品的夾層,例如用於染色體解剖。用適合恰好進入幀載玻片前麵的腔中的凸起的表麵結構的框架支承有助於組織切片應用到膜上。這就形成了一個平坦的表麵上,並支持該膜。該框架支承形成膜的骨架,因為它是,通過提供足夠的阻力和張力施加樣品膜(圖3a)。

等適當塗布玻璃膜載玻片,可以使用與PPS膜框架載玻片幾乎任何應用除了在DIC的模式。

而用POL膜框架滑動主要用於染色體夾層,采用PET膜框架的載玻片是優秀的後續MALDI-TOF分析技術。

特別FLUO膜特別適合用於熒光,PH值和DIC。

 

圖3A:用膜和框架的支持者作為“脊梁”金屬框架    圖3B:與框架支持者完整的幀載玻片插入


董事載玻片

從表達病理科主任的載玻片是膜免費回收使用“繪製和掃描”模式的特殊解決方案。

在“畫和掃描”模式也applyable通常的標準載玻片,但因此更多的能量需要樣品消融相比,DIRECTOR載玻片。

帽/離心管

夾層由LMD後,將樣品滴通過重力進入收集容器中,例如離心管和它們的瓶蓋。不同載玻片與瓶蓋的組合是最常見的應用中的激光顯微切割之一。大多數情況下,標準0.2毫升和0.5ml管中使用,無論是與空(幹)帽或具有帽填充有合適的緩衝液,或類似的合適的介質。例如,用RNA酶抑製劑在帽中的溶液可以在激光顯微切割過程之後立即防止核酸的分解。同樣,蛋白質可以保持在穩定的狀態下與緩衝溶液。空,幹股提供識別dissectates的一個很好的方式,可以通過服用前/後的圖片可以很容易地進行比較。基本上,microdissectate可以轉移到任何標準上限。圖4a和4b示出的匹配收集器帽和微量離心管。雖然可以使用專用OptiCaps,即使這些不是必需的徠卡激光顯微切割。OptiCaps具有集成的光學元件,以確保最佳的照明均勻性,也可以是“粘接劑”。

 

圖4a和4b:對於帽和微量離心管特殊收集裝置可以在正常的尺寸被用於0.2毫升(圖4A,上圖)和0.5ml(圖4a中,底部)。該收集器將樣品下立即位於,dissectates落入直入管帽由於重力的作用。


對於8孔條,8孔條帽和多井載玻片狀18-井Ibidi載玻片或LOC(芯片實驗室)滑動萬向支架

8孔條,可用於高容量應用(例如,對於活細胞收集到培養基),8孔條帽是理想的高通量應用。此外,萬向支架適合攜帶(片上實驗室)設備室載玻片,多井載玻片以及LOC。所有設備可以被用作用於激光顯微切割收集裝置。

8孔條

圖5a和5b:8孔條作為dissectate集熱使細胞培養物的高通量篩選。


(用作LCC模式收藏家)

收集器如這些被開發,以獲得通過解剖活細胞的後續檢查的更高的采樣,並且可以結合在一起形成的96孔托盤。圖5a和5b分別示出一個適當的保持器與8孔條,可以被接合,以形成良好的托盤。以及托盤的基礎用於執行高通量篩選細胞培養物。

使用這樣的篩選技術,大批量的單細胞培養物進行分析,並且如果有必要,在極短的時間內複墾。

8孔條帽

(分子生物學/ PCR)

0.2ml的8孔條蓋可以用作收集器用於激光顯微切割。繼激光顯微切割,8孔帶瓶蓋可以放在0.2毫升8孔條或96孔PCR-板直接插入PCR機(應要求提供)。使用8-帽帶已證明適合於隨後的PCR,定量PCR或其它加熱或冷卻過程中,特別是對於大量樣品。

 

圖a和6b:8孔條帽


LOC(芯片實驗室) - AmpliGrid

(載玻片尺寸:26×76 MM)

該AmpliGrid是LOC(芯片實驗室)的一種特殊形式,並且是另一替代用於收集LMD dissectates。所述AmpliGrid是在作為擴增平台超低體積應用疏水和親水區域化學結構滑動。它由一個標準大小的玻璃載片,其特點是它的48反應室這也適合用於收集解剖單細胞(圖7A,7B)。作為dissectates使用徠卡顯微鏡LMD6500 / 7000時轉移到AmpliGrid通過重力的作用,液體不一定必須要施加到反應點提前,為的是與采用的彈射技術手段的情況。解剖的細胞可以被收集“幹”。雖然可以使用的緩衝溶液,它不是強製性的。

細胞剝離,PCR或RT後(逆轉錄酶)-PCR是立即可以在AmpliGrid的使用超低體積擴增技術的48反應點。創建由疏水和親水相互作用,膠束表麵結構保持的反應混合物(其直接施加至AmpliGrid擴增)的形狀的壓降(通常為1微升)。

 

圖7a和7b:在插入專門收集人“,LOC捕手”(AmpliGrid)保證高樣品通量的PCR分析或RT-PCR方法。

通用持有人也能夠為其他LOC設備,例如18孔Ibidi ®載玻片和玻片活細胞培養應用。


耗材在LCC模式中使用

下麵的載玻片,在激光剝離,操作和選擇技術兼容LCC(活細胞培養)模式:

培養皿(與PEN膜)

可堆疊膜環

Ibidi載玻片

這些也可以作為收集容器恢複耕種。

另外,上述的滑動可與常用的收集器(0.5毫升試管,0.2 ml反應管,8孔條,LOC(組合芯片實驗室), Ibidi載玻片,常規培養皿和多個腔室培養玻片)。

培養皿

培養皿一般適合用於細胞培養(LCC),並且可有或無PEN膜。圖。圖8a示出了已示於圖的試樣保持器。2a和2b為大PEN載玻片和培養皿; 一個培養皿的PEN膜已經被插入,而不是一個大的滑動。圖。圖8b示出了使用的培養皿作為集電極的。

 

圖8a:在這裏,培養皿用在試樣保持器圖1中所示的大的載玻片和培養皿。2.可堆疊膜環也可以與此支架相結合。 圖8b:從激光顯微切割的dissectate由此處培養皿收集。


培養皿沒有PEN膜

(Ø50mm)

常規培養皿未經PEN膜用於收集和recultivate的dissectate。培養皿未經PEN膜不能用於激光顯微切割樣品支架使用。但是,選擇的區域可以被操縱的LMD激光和觀察到的時間使用時間推移短片拍攝功能很長時間。

培養皿PEN膜

(Ø為50mm,使用麵積為LMDØ30 MM)

細胞培養在培養皿用的PEN膜,可以在解剖LCC模式,並轉移到其他培養皿(使用或不使用的PEN膜)或其它合適的收集容器。該膜可以塗覆有聚-L-賴氨酸或膠原為更好的粘附和細胞生長。

可堆疊膜環

(Ø為50mm,使用麵積為LMDØ50mm)

這些是覆蓋有被插入到50mm直徑的標準細胞培養皿的膜環。可堆疊膜環使得能夠在活小區扇區進行激光顯微切割,並且是單細胞的選擇是特別有用的。可堆疊膜環還可以連接以形成雙鏈體的環係統,以使所述dissectate的無汙染傳輸。2堆疊膜環擰在一起用於此物鏡。立即進一步培養所述dissectate的也有可能與夾層技術。可堆疊膜環,可以用來作為試樣夾具和作為dissectates集合持有人。擰在一起作為一個三明治,他們並不需要一個專門收集持有者 - dissectates直接捕捉底部膜環。與合適的帽或可選氣候室的解剖係統使一個無汙染的選擇過程。

Ibidi載玻片

(載玻片尺寸:26×76mm,30微升液體適用每孔)

這些載玻片都配備了孔是專門為活細胞的激光顯微切割設計的。每張載玻片有18個凹槽與PEN薄膜基地。

Ibidi載玻片可以用適於將LCC模式收集器的整個範圍內進行組合。另一個無汙染選擇變體是所謂的滑棧(圖9a,9b),由2 Ibidi滑動布置在彼此的頂部在夾層技術。細胞從這種疊落解剖由重力作用直接進入下一個較低Ibidi滑動,其被固定在一個特殊的堆疊保持件(圖9a,9b)。隨後恢複耕種是可能的。

的匹配帽提供進一步汙染保護選項。

圖9A:2 Ibidi載玻片在彼此的頂部構成載玻片棧提供與激光顯微切割另一無汙染選擇選項。 圖9B:作為收藏家的LOC持有人Ibidi載玻片。



Ibidi載玻片也可以用來作為收集裝置結合的萬向支架作為LOC裝置(見上文)。

 

表1:膜載玻片和培養皿激光顯微切割 - 切割性能,取決於膜型,膜支撐,物鏡用過的比較。激光顯微切割性能: - 不適合; +滿意; ++好; +++非常好。ªThese物鏡具有改善的光學係統中具有最佳的圖像質量相結合UV光傳輸。D代表校正環的位置。

表1:膜載玻片和培養皿激光顯微切割 - 切割性能,取決於膜型,膜支撐,物鏡用過的比較。激光顯微切割性能: - 不適合; +滿意; ++好; +++非常好。ªThese物鏡具有改善的光學係統中具有最佳的圖像質量相結合UV光傳輸。D代表校正環的位置。

 訂單號
 (*無RNA酶的載玻片)

產品說明/數量

使用麵積為LMD(約)

膜的厚度

Objectivesª 
高品質圖像推薦物鏡CORR設置

熒光適用性


 5x

6.3xª

10x

L20x 
CORRª 

L40xCORRª

L63xCORRª

150x 

11505273 
50張載玻片/盒

玻璃,聚苯硫醚膜
(25×76mm)

19mmX41mm

1.2um

++

++

+

+++ 
D = 1.0

+++ 
D = 1.0

+++ 
D = 1.0

-

+

適用於幾乎所有的應用程序(除了DIC); 聚苯硫醚是半透為水,不浸入水/含水溶液

11505268 
50張載玻片/盒

鋼框架,PPS膜
(25×76mm)

16mm×45mm

1.2um

++

++

+

+++ 
D = 1.0

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

+++

++

適用於幾乎所有的應用程序(除了DIC)

11505158

玻璃,PEN膜
(25×76mm)

19mmX41mm

2um

++

++

+

+++ 
D = 1.0

+++ 
D = 1.0

+++ 
D = 1.0

-

+

最流行的載玻片:在95%的應用程序的標準地使用

* 11505189 
50張載玻片/盒

11532910

蓋玻片,PEN膜
(25×78mm)

19mmX41mm

2um

++

++

+

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

++

+

推薦染色體利差

11505151

鋼框架,PET膜
(25×76mm)

16mm×45mm

1.4um

++

++

+

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

++

+

推薦MALDI-TOF

* 11505190 
50張載玻片/盒

1505191

鋼框架,POL膜
(25×76mm)

16mm×45mm

0.9um

++

++

+

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

+++

++

推薦染色體利差

50張載玻片/箱

1505215(無菌)
100片/盒

大型玻璃的PEN膜
(50×76mm)

39mm×45mm

2um

++

++

+

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

-

+

對於大型組織切片(如神經生物學腦載玻片),需要可選滑架

1532860(無菌)
100片/盒

大型玻璃的PPS膜
(50×76mm)

39mm×45mm

1.2um

++

++

+

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

-

+

1600250 
5載玻片/盒

鋼框架,FLUO膜
(25×76mm)

16mm×45mm


-

+

+

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0

+

+++

對於熒光和DIC對比

1505172 
20蝶/盒

50mm培養皿PEN膜

直徑30mm

2um

+

+

++

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0


D = 0

-

+

對於活細胞切割; 貼壁細胞恢複耕種或分析直接LMD

1505240(無菌)
15載玻片/盒

μ-載玻片,18孔與PEN膜

30微升卷。每口井

2um

+

+

++

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0


D = 0

-

+

1532638(無菌)
4蝶/盒

可堆疊膜環50mm培養皿,PEN膜

直徑30mm

2um

+

+

++

+++ 
D = 0

+++ 
D = 0


D = 0

-

+





滬公網安備 31011202003519號