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尼康顯微鏡雙頻激發塊FITC-Texas Red

2018-03-29  發布者:admin 

紫外線和尼康FITC-Texas Red濾光片組合可見光透射光譜曲線下麵示於圖1.該過濾器組被設計用於將信號從異硫氰酸熒光素(FITC)和Texas Red在雙標記實驗中的探針最佳檢測,並采用激發濾光器與窄帶通窗口在藍色(490-505nm),綠色(560-580nm)光譜區。 並入到單個元件中的雙發射(阻擋)激發塊的通帶允許同時從兩個熒光檢測的綠色和紅色發光。具有選擇為互補的發射和激發波長的兩個帶通透射區域(多色)一個二色鏡的透射和反射帶的每一個過濾器,和應用程序之間的尖銳過渡,允許雙波段信號檢測以最小的幹擾。

雙激發激發塊模塊FITC-Texas Red規格:

  • 激發波長篩選:490-505nm(帶通,498 CWL)和560-580nm(帶通,570 CWL)

  • 多色鏡波長:510-555nm(帶通)和585-665nm(帶通)

  • 屏障過濾波長:515-545nm(帶通,530 CWL)和600-650nm(帶通,625 CWL)

FITC-Texas Red雙激發帶的熒光濾光器組合是用於同時檢測的熒光染料FITC-Texas Red與帶之間的最小串擾的專門設計的,並且可以與其他對具有相似光譜分布的熒光探針的使用。過濾器設置的較短波長信道將選擇狹義的光譜區域為藍色激發和綠色發光檢測,而較長的波長成分對應綠色激發和紅光發射檢測。 研究以下熒光團的各種組合時FITC-Texas Red激發塊組建議:FITC,綠色熒光蛋白(GFP),的Cy2,BODIPY FL,Oregon Green,或的Alexa Fluor 488(藍色激發),配對Texas Red或Alexa Fluor 594(綠色激發)。 在圖2中呈現的圖像表明具有多種針對不同細胞內位置的熒光探針對這個激發塊組合的性能。

示於圖2(a)是從的Madin-Darby犬腎(MDCK線)染色的細胞與MitoTracker紅CMXRos和Alexa Fluor 488鬼筆環肽,其靶向細胞內的線粒體的網絡和細胞骨架的肌動蛋白絲,分別培養的熒光發射。 最大吸收MitoTracker RED CMXRos的是579nm,並且最大發射發生在599nm,而為的Alexa Fluor 488中的相應值是498和519nm。 另外,將試樣同時用DAPI染色(在細胞核靶向DNA;藍色發光)。 注意沒有來自藍色(DAPI)熒光信號,但明亮的橙紅色熒光被管狀線粒體,並從在細胞質肌動蛋白絲的綠色發射表現。

綿羊表皮皮膚組織的一個薄的部分染色DNA和糖蛋白與SYTOX Orange和Oregon Green488麥胚凝集素,分別示於圖2(b)。 最大吸收SYTOX橙是547nm,並且最大發射發生在570nm,而對於Oregon Green488中的相應值是496和524nm。 另外,將試樣同時染色的Alexa Fluor 350綴合至鬼筆環肽(靶向肌動蛋白網絡;藍色發光)。 注意沒有信號從藍色(的Alexa Fluor 350)的熒光團,但明亮的橙紅色熒光由核和從毛囊的細胞質和膜元件的糖蛋白的綠色發射表現。奧林巴斯顯微鏡

在印度麂的鹿皮沾上的Alexa Fluor 568綴合的鬼筆環肽和LysoTracker綠DND-26成纖維細胞,其靶向細胞內的肌動蛋白和溶酶體的培養熒光發射,分別被顯示在圖2的(c)。 最大吸收的Alexa Fluor 568的是578nm,並且最大發射發生在603nm,而對於LysoTracker綠DND-26的相應的值是501和511nm。 另外,將試樣同時用DAPI染色(靶向DNA在細胞核中;激發在358nm,並且發射在461nm)。 注意沒有來自藍色熒光團(DAPI)的信號,但明亮的綠色和桔紅色熒光通過在細胞骨架網絡的溶酶體和肌動蛋白絲表現出的存在。

圖2(D)展示了從海拉癌細胞轉染的EGFP-過氧化物酶體靶向信號1(PTS1)的融合蛋白,並用的Alexa Fluor 546鬼筆環肽的培養的熒光發射。 這些熒光探針靶向過氧化物酶體和細胞骨架肌動蛋白絲的網絡,分別。 最大吸收的EGFP-PTS1嵌合體是488nm,並且最大發射發生在507nm,而對於將Alexa Fluor 546的相應的值是556和573nm。 另外,將試樣同時用Hoechst 33258(靶向於細胞核中的DNA;藍色發光)。 注意沒有來自藍色熒光信號,但明亮的橙紅色熒光的細胞骨架肌動蛋白絲,並從在細胞質中過氧化物酶體的強烈綠色發射表現。

兔肺組織染色的肌動蛋白絲和糖蛋白的Alexa Fluor 546鬼筆環肽和Oregon Green488麥胚凝集素的薄膜部,分別示於圖2(e)所示。 最大吸收的Alexa Fluor 546的是556nm,並且最大發射發生在573nm,而對於Oregon Green488中的相應值是496和524nm。 另外,將試樣同時用DAPI染色(在細胞核靶向DNA;藍色發光)。 注意沒有來自藍色熒光信號,但明亮的橙紅色熒光絲狀肌動蛋白,並從在組織切片的細胞質和膜糖蛋白成分的綠色發光發揮。

由薄苜蓿的部分自發熒光發射強度( 紫花苜蓿 )的根組織中演示了圖2(f)所示。 在植物組織中的內源性的自發熒光產生於各種生物分子,包括木質素,葉綠素,β-胡蘿卜素,葉黃素和。 在藍色和綠色的激發區域,葉綠素具有吸收帶,具有高消光係數,並產生一個顯著量熒光在與450和550nm之間的波長激發。 對於以上說明的苜蓿根組織,注意自發熒光發射強度中的綠色和紅色光譜區域的存在,這是尼康FITC-Texas Red熒光激發塊組合的特性。




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